当前位置:凯发k8一触即发-凯发k8娱乐 > 技术文章 > 耗材专区 ezseptm max固相萃取柱检测动物性食品中碘醚柳胺残留量
前言:
碘醚柳胺是卤化水杨酰苯胺类杀吸虫药,可以抑制虫体线粒体的磷酸化过程,从而阻止虫体内三磷酸腺甙chemicalbook(atp)的合成,导致虫体能量代谢的活力迅速减弱而死亡。它与血液蛋白有很强的亲和力,所以药效在血液中有较长的持续时间,造成药物在动物体内富集,而人类食用这些肉类会使兽药残留进入人体,从而影响身体健康。
本文参照《动物性食品中碘醚柳胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法(征求意见稿)》,利用ezseptmmax固相萃取柱(60 mg/3ml,货号:pz12802)进行净化,再用高效液相色谱串联质谱仪进行检测,建立了一种对动物性食品中碘醚柳胺残留量的分析方法。
关键词:
动物性食品,碘醚柳胺,固相萃取
1, 实验过程
mprep-spe08手动固相萃取装置,货号:pz0008,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
e.t.氮吹浓缩仪,货号:c020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
4500质谱系统,sciex公司;
ezseptmmax固相萃取柱(60 mg/3ml,货号:pz12802),北京莱伯帕兹检测科技有限公司;
冷冻离心机,gl-20g-ⅱ,上海安亭科学仪器厂 ;
甲醇(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
乙腈(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;
甲酸,氨水,三乙胺等化学品均为分析纯或以上,购自国药集团化学试剂有限公司。
碘醚柳胺标准物质:100mg/瓶,购自坛墨质检标准物质中心 。
碘醚柳胺标准储备液:取碘醚柳胺标准品适量(相当于有效成分约10mg),精密称定,用乙腈稀释至10ml容量瓶中,配制成浓度为1000μg/ml的碘醚柳胺标准储备液。
碘醚柳胺标准中间液:移取碘醚柳胺标准储备液0.1ml,用乙腈稀释至10ml容量瓶中,配制成浓度为10μg/ml的碘醚柳胺标准中间液。
碘醚柳胺标准使用液:碘醚柳胺标准中间液0.1ml,用乙腈稀释至10ml容量瓶中,配制成浓度为0.1μg/ml的碘醚柳胺标准使用液。
分别移取0.1μg/ml的碘醚柳胺标准使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0ml分别置于10ml容量瓶中用甲醇定容至刻度,标准浓度为0.2 μg/l、1μg/l、5μg/l、20μg/l、50μg/l。
1.3 实验部分
取羊腰试样2g,置于50 ml聚丙烯离心管中,加10.0 ml 1%三乙胺乙腈溶液均质5min,超声提取10 min,8000 r/min离心5 min,收集上清液至另一50 ml离心管中残渣中加10.0 ml 1%三乙胺乙腈溶液,重复提取一次,合并两次上清液,混匀,取提取液5.0 ml备用待净化。
ezseptmmax固相萃取柱(60 mg/3ml,货号:pz12802)用5ml乙腈进行活化,取1.3.1待净化液上样,上样结束后用5ml乙腈淋洗萃取柱,再用5ml 5%甲酸乙腈洗脱萃取柱,收集洗脱液,以e.t.氮吹浓缩仪,45℃氮气浓缩至近干,加2.0 ml甲醇,涡旋混匀过微孔滤膜后供lc-ms/ms测定。
色谱柱:shim-pack velox c18(2.7μm,2.1*100mm);
检测方式:多反应监测(mrm);
流动相:a:0.1%氨水水溶液 b: 甲醇;
流速:0.3ml/min;
进样量:5μl。
表1流动相梯度洗脱表
时间min | 流动相a% | 流动相b% |
0 | 70 | 30 |
5 | 0 | 100 |
8 | 0 | 100 |
8.1 | 70 | 30 |
10 | 70 | 30 |
1, 实验结果
图1 标液色谱图
图2碘醚柳胺标准曲线图
1, 结论
本次实验展示了使用ezseptmmax固相萃取柱(60 mg/3ml,货号:pz12802)对动物性食品中碘醚柳胺残留量进行净化,通过高效液相色谱串联质谱进行测定,其加标回收率在85.0%~93.3%之间,rsd在3.6%,能够满足标准要求。说明ezseptmmax固相萃取柱(60 mg/3ml,货号:pz12802)能很好的完成方法中的净化工作,并且结果稳定、可靠。
2, 参考文献
1. 《动物性食品中碘醚柳胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法(征求意见稿)》
表1 加标回收率结果